彈簧色譜柱一般是保存在甲醇或乙腈中。使用前一定注意所使用的流動相和甲醇或乙腈能夠互溶。色譜柱在保存過程中有可能因為溶劑的揮發(fā)而干涸,所以在使用流動相分析之前應(yīng)使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱。如果所使用的流動相中含有緩沖鹽,則應(yīng)注意用水作為過渡,而不能直接將有機溶劑和緩沖鹽直接混合。測試結(jié)束后沖洗柱子也要注意這一點。還有一點需要注意的是不要使用純水沖洗色譜柱。對于非極性柱,比如C8和C18,由于純水不能浸潤填料表面而沖倒碳鏈,造成柱效下降。另外,分析樣品時由于純水不能浸潤填料表面形成水膜,出現(xiàn)樣品不保留而使分離度下降,重復(fù)性差,所以對于一般的C8和C18柱,有機溶劑的比例不應(yīng)低于5%。
彈簧色譜柱的使用說明:
(1)色譜桂使用前注意事項:
色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應(yīng)先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
(2)流動相:
流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經(jīng)過0.45um的濾膜過濾一次則更好,尤其是含鹽的流動相。另外,裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應(yīng)該定期清洗或更換。
以常規(guī)硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的PH值適用范圍是2.0-8.0,BDSC18適合于堿性化合物,PH值適用范圍為2.0-10.0。當(dāng)必須要在PH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時,每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動相互溶的溶劑清洗,并置換掉原來所使用的流動相。